GB/T 45106-2024 动物钩端螺旋体病诊断技术

ICS11.220
CCS B41
中华人民共和国国家标准
GB/T45106—2024
动物钩端螺旋体病诊断技术
Diagnostictechniqueofleptospirosisinanimals
2024-12-31发布2025-07-01实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会发布

目 次
前言………………………………………………………………………………………………………… Ⅲ
引言………………………………………………………………………………………………………… Ⅳ
1 范围……………………………………………………………………………………………………… 1
2 规范性引用文件………………………………………………………………………………………… 1
3 术语和定义……………………………………………………………………………………………… 1
4 缩略语…………………………………………………………………………………………………… 1
5 临床诊断………………………………………………………………………………………………… 1
5.1 流行病学…………………………………………………………………………………………… 1
5.2 临床症状…………………………………………………………………………………………… 2
5.3 实验室常规检查…………………………………………………………………………………… 2
5.4 剖检变化…………………………………………………………………………………………… 2
5.5 结果判定…………………………………………………………………………………………… 2
6 生物安全要求…………………………………………………………………………………………… 2
7 样品采集与保存………………………………………………………………………………………… 3
7.1 样品采集…………………………………………………………………………………………… 3
7.2 样品保存…………………………………………………………………………………………… 3
8 分离培养鉴定…………………………………………………………………………………………… 3
8.1 器材………………………………………………………………………………………………… 3
8.2 试剂………………………………………………………………………………………………… 3
8.3 样品处理与培养…………………………………………………………………………………… 3
8.4 结果判定…………………………………………………………………………………………… 3
9 PCR ……………………………………………………………………………………………………… 4
9.1 器材………………………………………………………………………………………………… 4
9.2 试剂………………………………………………………………………………………………… 4
9.3 提取DNA ………………………………………………………………………………………… 4
9.4 引物………………………………………………………………………………………………… 4
9.5 扩增体系…………………………………………………………………………………………… 4
9.6 扩增程序…………………………………………………………………………………………… 4
9.7 扩增产物电泳检测………………………………………………………………………………… 5
9.8 实验成立条件……………………………………………………………………………………… 5
9.9 结果判定…………………………………………………………………………………………… 5
10 MAT …………………………………………………………………………………………………… 5
10.1 器材5 …………………………………………………………………………………………………Ⅰ
GB/T45106—2024
10.2 试剂………………………………………………………………………………………………… 5
10.3 定性试验…………………………………………………………………………………………… 5
10.4 定量试验…………………………………………………………………………………………… 6
10.5 MAT结果判定…………………………………………………………………………………… 7
11 综合判定………………………………………………………………………………………………… 7
12 鉴别诊断………………………………………………………………………………………………… 7
附录A (规范性) 试剂溶液的配制方法………………………………………………………………… 8
A.1 EMJH培养基……………………………………………………………………………………… 8
A.2 50×TAE贮存液…………………………………………………………………………………… 8
A.3 1%琼脂糖凝胶…………………………………………………………………………………… 9
A.4 PBS缓冲液………………………………………………………………………………………… 9
附录B(资料性) 引物使用说明………………………………………………………………………… 10
附录C(资料性) 各血清群标准抗原及阳性血清的制备……………………………………………… 11
C.1 各血清群标准抗原的制备………………………………………………………………………… 11
C.2 各血清群标准阳性血清的制备…………………………………………………………………… 11
附录D(资料性) MAT结果判定示意图……………………………………………………………… 13
附录E(资料性) 钩体病的鉴别诊断…………………………………………………………………… 16
E.1 犬细小病毒病……………………………………………………………………………………… 16
E.2 犬瘟热……………………………………………………………………………………………… 16
E.3 牛羊猪布鲁氏杆菌病……………………………………………………………………………… 16
参考文献……………………………………………………………………………