T/YYTC 009-2024 吉林长白山灵芝菌种生产技术规程

ICS 65.05.020
CCS B 39
YYTC
吉林省园艺特产协会团体标准
T/YYTC 009—2024
吉林长白山灵芝菌种生产技术规程
Technical code of practice for the production of ganoderma lucidum spawn in
Changbai mountain, Jilin
2024 - 12 - 31 发布2025 - 01 - 01 实施
吉林省园艺特产协会 发布
T/YYTC 009—2024
I
前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由吉林省园艺特产协会提出并归口。
本文件起草单位：吉林农业科技学院、吉林省园艺特产管理站、吉林农业大学、公主岭市农业综合
行政执法大队、长春大学、北华大学、吉林省科学技术信息研究所、吉林省农业技术推广站、吉林市种
子管理站、吉林一亩田农业技术开发有限公司、白山市永盛农业科技开发有限公司、吉林省蒽芝康生物
科技有限公司、蛟河市黄松甸镇康芝园灵芝专业合作社、吉林芝福生物科技有限公司、惠丰菌业（吉林
省）有限公司、吉林芝业生物科技有限公司。
本文件主要起草人：徐济责、柴秋泉、刘晓龙、杨思思、李雷、周思意、张春兰、陈昊良、周金梅、
沈健、张晓旭、张雪超、秦影、张桐、包建琴、曹中丽、周学峰、金元举、王子旭、张庆康、郑目君、
于涛、王大权。
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II
引言
吉林长白山是我国四大灵芝主产区之一，也是我国重要的段木灵芝产区。灵芝栽培已成为吉林省东
部林区的支柱产业，但当前灵芝菌种生产方式参差不齐，2018 年，吉林省园艺特产协会获批“地理标
志农产品吉林长白山灵芝”。为充分发挥地理标志农产品品牌效应，从源头控制吉林长白山灵芝产品
质量，制定本文件，旨在规范吉林长白山灵芝菌种的生产环节，实现“品种培优、品质提升、品牌打造
和标准化生产”， 从而实现优质优价，更好地促进吉林长白山灵芝产业提档升级、农民增收致富。
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吉林长白山灵芝菌种生产技术规程
1 范围
本文件确立了吉林长白山灵芝菌种生产的程序，规定了术语和定义、场地环境、设施设备、制种技
术、检验规则、包装、运输等阶段的操作指示，描述了生产记录与档案追溯方法。
本文件适用于吉林长白山灵芝菌种生产要求。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB 150.1 压力容器第1部分：通用要求
GB 5749 生活饮用水卫生标准
GB 4806.7 食品用接触用塑料材料及制品
NY/T 1276 农药安全使用规范总则
NY/T 1731 食用菌菌种良好作业规范
NY/T 1742-2009 食用菌菌种通用技术要求
NY/T 528-2010 食用菌菌种生产技术规程
3 术语和定义
GB/T 12728 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
地理标志吉林长白山灵芝Ganoderma lucidum from Changbai Mountain, Jilin Province
在中华人民共和国农业农村部吉林长白山灵芝（2018 年第62 号）公告区域范围内，按照吉林长
白山灵芝生产技术生产，质量符合本标准要求的赤芝[Ganoderma lucidum（Leyss. Ex Fr.）Karst]子
实体。
菌种
生长在适宜基质上具有结实性的菌丝培养物，包括母种、原种和栽培种。
[来源GB/T 12728]
4 技术流程
菌种生产技术流程见图1.
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图1 吉林长白山灵芝菌种生产技术流程图
5 场地环境
场地选择
5.1.1 选择地势高燥、平坦，通风良好，排水畅通，交通便利的场所，周边环境清洁，无污染源。
5.1.2 300 m 之内无规模养殖的禽畜舍、垃圾和粪便堆积场，无污水、废气、烟尘和粉尘等污染
源，50 m 内无食用菌栽培场所、集贸市场。
[来源：NY/T 528—2010 中4.2，有修改]
生产用水
生产用水应符合GB 5749 的规定。
6 设施设备
基本设施及布局
基础设施及布局应符合NY/T 528 中4.3 和4.4.2 规定。
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基本设备
天平（感量0.1g～0.001g）、高压灭菌锅（1.05kg/cm²）、粉碎机、磅秤、超净工作台或接种箱、
空调、除湿机、培养架、恒温培养箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装袋机。
7 制种技术
菌种选择
应选择经过省级及以上行业主管部门审（认）定或登记（备案）、具有食用菌菌种生产和经营资质
的供种单位购买，质量应符合NY/T 1742 的规定。
一级种生产
7.2.1 PDA 培养基制作
称取200 g 去皮的马铃薯，切成长和宽0.5 cm 的条，加1000 mL 水煮沸20 min～30 min，8 层
纱布过滤，取滤液后定容至1000 mL，加入20 g 葡萄糖和18 g～20 g 琼脂粉。
7.2.2 分装、灭菌
将配制好的PDA 培养基分装至18 mm × 180 mm 或20mm × 200 mm 玻璃试管的1/4 处。试管口
应保持干净，分装后塞入棉塞或硅胶塞，并用牛皮纸包扎。包扎好的直立放在高压灭菌锅内高压蒸汽灭
菌，121℃ 保持30 min。
7.2.3 摆斜面
灭菌后的试管培养基冷却至60℃±5℃，将试管倾斜摆放在操作台桌面上，试管口比试管底部高
1.5 cm±0.2 cm，摆成斜面培养基，斜面长度约为试管长度的3/4。
7.2.4 无菌检验
随机抽取5% 的试管斜面培养基（每批抽样量不得少于10 支），在35℃±1℃ 培养2 d，检查
有无微生物菌落，无菌落的为合格。
7.2.5 接种
7.2.5.1 超净工作台或接种箱应彻底消毒后方可使用，在接种前用紫外灭菌灯照射30 min，
接种人员应严格按照无菌操作要求进行手和衣物的消毒。
7.2.5.2 接种用具使用前在酒精灯火焰上灼烧灭菌、冷却。接种时一只手握斜面试管，另一只
手迅速拔开试管塞，用接种铲取3 mm～5 mm 大小的菌种块迅速放在待接斜面培养基中央位置，
迅速用棉塞或硅胶塞塞好试管，整个操作过程应在火焰周围10 cm 范围内进行。
7.2.5.3 将接种好的试管贴好菌种名称、接种日期的标签。
7.2.6 培养
接种后的试管置于25℃±2℃ 的培养箱避光培养。于接种后第2 天和第5 天分别进行逐个检
查，挑出未活、污染和生长不良试管。
7.2.7 菌种质量标准
菌种质量应满足表1 要求。
表1 灵芝母种感官要求
项目要求来源
容器完整、无损、洁净
NY/T 1742—2009 中表1
气味无异味
拮抗线无
菌丝生长量长满斜面NY/T 1742—2009 中表1,有修改
菌丝体特征白色绒毛状、生长致密、均匀、健壮、
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项目要求来源
平整、无变黄
菌丝分泌物无
菌落边缘整齐
杂菌无
斜面背面观
培养基不干缩、无水珠、无色素、颜色
均匀
棉塞或硅胶塞
干燥、整洁、松紧适度、既满足透气又
保证过滤空气
斜面长度顶端距塞30 mm±5 mm
7.2.8 母种保藏
在4 ℃～6 ℃ 下避光保藏，保藏期不超过90 天。
原种、栽培种生产
7.3.1 培养料
木屑、麸皮等要求新鲜、无虫、无螨、无霉、洁净、干燥。配方可选择下列其中之一：
a) 阔叶木屑78%，麸皮20%，石膏1％，过磷酸钙1%；
b) 棉籽壳50%，阔叶木屑30%，麸皮17%，蔗糖1%，石膏1％，石灰1%。
7.3.2 拌料
按照配方准确称取各种原材料，遵循先干拌再湿拌的原则搅拌均匀，或者使用拌料机拌料，培养料
含水量控制在60% ± 1%。
7.3.3 装袋
7.3.3.1 拌料结束后立即装入聚丙烯塑料袋，聚丙烯塑料袋应符合GB 4806.7 的要求。
7.3.3.2 原种袋采用规格为长（12 cm～17 cm）×宽（22 cm～28 cm）×厚（0.04 cm～0.06 cm）；
栽培种袋采用规格为长（15 cm～17 cm）×宽（35 cm～38 cm）×厚0.05 cm 。
7.3.3.3 装料要求松紧适中，使用无棉盖体或周转棒封口，装好后在4 h 内装锅灭菌。
7.3.4 灭菌
采用高压蒸汽灭菌，灭菌温度达到121 ℃～126 ℃ 后保持2.5 h～3.0 h。
7.3.5 冷却
灭菌结束后，灭菌锅内温度降至50 ℃～60 ℃，趁热将料袋搬运到冷却室，冷却至28 ℃±2 ℃ 。
7.3.6 接种
7.3.6.1 超净工作台或接种箱应彻底消毒后方可使用，在接种前用紫外灭菌灯照射30 min，
接种人员应严格按照无菌操作要求进行手和衣物的消毒。
7.3.6.2 接种用具使用前在酒精灯火焰上灼烧灭菌、冷却。接种时一只手握斜面试管（或菌种
袋/瓶），另一只手迅速拔开试管塞（或打开菌种封口物），用接种工具取3 mm～5 mm 大小的
菌种块（或2 cm3 左右的菌种块或2 根枝条菌种）迅速接入料袋中央位置，迅速用封口物封好料
袋，整个操作过程应在火焰周围10 cm 范围内进行。
7.3.6.3 将接种好的试管贴好菌种名称、接种日期的标签。
7.3.7 培养
培养室使用前要彻底消毒和杀虫，药剂的选用和使用应符合GB/T 8321（所有部分）和NY/T 1276
的规定。培养室要求环境干净卫生，通风、避光、保温条件良好，温度控制在25℃ ± 2℃。
7.3.8 培养期检查
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培养3 天后开始不定期检查菌袋，及时清理污染袋、生长不良等不合格菌袋。
7.3.9 菌种质量
原种和栽培种质量均应满足NY/T 1742—2009 中3.2 要求，同时还应满足表2 要求。
表2 灵芝二级种和三级种感官要求
项目要求来源
容器洁净、完整
培养基贴壁、无干缩NY/T 1742—2009 中表1
气味无异味
海绵塞或无棉盖体
干燥、洁净、松紧适度、能满足透气和滤
菌要求
NY/T 1742—2009 中表1,有修改
菌丝生长量长满容器
菌丝特征菌丝洁白、生长旺盛、整齐
培养基和菌丝体
培养基无干缩现象、无菌皮形成、无原基
形成
菌丝分泌物无
杂菌无
7.3.10 原种、栽培种保藏
菌种长好后在4℃~6℃ 避光保藏，保藏期不超过45 天。
8 检验
按照NY/T 1742 中第5 章的检验方法进行检验，检验项目应全部符合7.2.7 和7.3.9 要求，任
何一项不符合要求的为不合格菌种。
9 包装、运输
包装
9.1.1 母种使用锡箔纸包好，外包装采用泡沫箱或有足够硬度的纸箱，内部有缓冲作用的轻质材料填
充，要保证使用材料的洁净和空间卫生。要有合格证书和使用说明书。
9.1.2 原种和栽培种外包装宜采用有足够硬度的纸箱或塑料箱，菌种之间有缓冲作用的轻质材料填充，
要保证使用材料的洁净和空间的卫生。要有合格证书和使用说明书。
运输
9.2.1 不应与有毒物品混装运输。
9.2.2 宜采用冷链运输。
9.2.3 运输过程应有防震、防晒、防尘、防雨、防冻、防杂菌等措施。
10 生产记录与档案
应详细、准确、真实记录生产过程，记录信息如附录A，并建立生产记录档案，档案应保存至菌种
售出后2 年，做到可追溯。
生产档案应记录生产地点、时间、数量、培养基配方、培养条件、菌种来源、操作人、技术负责人、
检验记录、菌种流向等内容。
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A
A
附录A
（资料性）
菌种生产记录
A.1菌种生产记录见表A.1
表A.1 菌种生产记录表
项目记录项目记录
母种
菌种名称购买后贮存温度/湿度
菌种来源菌种使用时间
购买菌种类型培养基配方
购买数量接种前消毒方式
满管时间发菌温/湿度
购买前贮存温度/湿度接种数量
购买菌种培养基配方成活率
运输方式染菌率
采购人接种员
原种
菌种名称购买后贮存温度/湿度
菌种来源菌种使用时间
购买菌种类型培养基配方
购买数量接种前消毒方式
满管/袋时间发菌温/湿度
购买前贮存温度/湿度接种数量
购买菌种培养基配方成活率
运输方式染菌率
采购人接种员
栽培种
菌种名称购买后贮存温度/湿度
菌种来源菌种使用时间
购买菌种类型培养料配方
购买数量接种前消毒方式
满袋时间发菌温/湿度
购买前贮存温度/湿度接种数量
购买菌种培养基配方成活率
运输方式染菌率
采购人接种员