GB/T 45101-2024 动物炭疽诊断技术

ICS11.220
CCS B41
中华人民共和国国家标准
GB/T45101—2024
动物炭疽诊断技术
Diagnostictechniquesforanimalanthrax
2024-12-31发布2025-07-01实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会发布

目 次
前言………………………………………………………………………………………………………… Ⅲ
引言………………………………………………………………………………………………………… Ⅳ
1 范围……………………………………………………………………………………………………… 1
2 规范性引用文件………………………………………………………………………………………… 1
3 术语和定义……………………………………………………………………………………………… 1
4 缩略语…………………………………………………………………………………………………… 1
5 生物安全措施…………………………………………………………………………………………… 1
6 临床诊断………………………………………………………………………………………………… 2
6.1 流行特点…………………………………………………………………………………………… 2
6.2 临床症状…………………………………………………………………………………………… 2
6.3 病理变化…………………………………………………………………………………………… 2
6.4 结果判定…………………………………………………………………………………………… 3
7 样品的采集、保存、运输和处理………………………………………………………………………… 3
7.1 样品的采集………………………………………………………………………………………… 3
7.2 样品的保存与运输………………………………………………………………………………… 3
7.3 样品的处理………………………………………………………………………………………… 3
8 实验室诊断……………………………………………………………………………………………… 4
8.1 染色镜检…………………………………………………………………………………………… 4
8.2 分离与鉴定………………………………………………………………………………………… 5
8.3 γ噬菌体裂解试验和青霉素抑制试验…………………………………………………………… 6
8.4 PCR ………………………………………………………………………………………………… 6
8.5 Real-timePCR……………………………………………………………………………………… 8
8.6 环状沉淀试验(Ascoli试验) ……………………………………………………………………… 9
9 综合判定………………………………………………………………………………………………… 10
附录A (规范性) 试剂的配制…………………………………………………………………………… 11
A.1 草酸铵结晶紫染色液…………………………………………………………………………… 11
A.2 革兰氏碘液……………………………………………………………………………………… 11
A.3 沙黄复染液……………………………………………………………………………………… 11
A.4 碱性美蓝染色液………………………………………………………………………………… 11
A.5 5%~7%马或羊血琼脂平板…………………………………………………………………… 11
A.6 PLET琼脂平板…………………………………………………………………………………… 11
A.7 普通营养肉汤…………………………………………………………………………………… 11
A.8 普通营养琼脂平板……………………………………………………………………………… 11
Ⅰ
GB/T45101—2024
A.9 0.7%碳酸氢钠琼脂平板………………………………………………………………………… 11
A.10 50×TAE电泳缓冲液…………………………………………………………………………… 12
A.11 2%琼脂糖凝胶………………………………………………………………………………… 12
A.12 0.5%苯酚生理盐水……………………………………………………………………………… 12
附录B(资料性) 核酸检测用引物、探针序列信息及扩增结果图…………………………………… 13
B.1 炭疽杆菌PCR引物……………………………………………………………………………… 13
B.2 炭疽杆菌PCR扩增产物电泳图………………………………………………………………… 13
B.3 Real-timePCR引物和探针……………………………………………………………………… 13
B.4 炭疽杆菌PA基因实时荧光PCR扩增曲线图………………………………………………… 14
B.5 炭疽杆菌CA基因实时荧光PCR扩增曲线图………………………………………………… 14
附录C(资料性) 炭疽杆菌PCR阳性对照重组质粒的目的基因序列……………………………… 15
C.1 炭疽杆菌保护性抗原基因(PA)重组质粒参考序列…………………………………………… 15
C.2 炭疽杆菌荚膜基因(CA)重组质粒参考序列…………………………………………………… 15
附录D(资料性) 环状沉淀试验结果图………………………………………………………………… 16
参考文献…………………………………………………………………………………………………… 17
Ⅱ
GB/T45101—2024
前 言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
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本文件由中华人民共和国农业农村部提出。
本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本文件起草单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究
所、中国兽医药品监察所、北京市动物疫